非洲猪瘟检测试剂盒厂家选择风途可不错哦

2021年07月26日 13:20:32 人气: 435 来源: 山东风途物联网科技有限公司

　　非洲猪瘟检测试剂盒厂家【Abakora ibicuruzwa byo muri Afurika byingurube】非洲猪瘟检测试剂盒生产厂家选择风途，型号为FT-ZWSJ2

　　非洲猪瘟是一种非洲猪瘟属病毒，病毒粒子为20面体对称，直径约200mm。病毒带有囊膜，分为22个不同基因型，只有1个不同的血清型。非洲猪瘟在生猪和野猪的白细胞都可复制，尤其是养殖生猪。因为非洲猪瘟病例发生在1921年的肯尼亚，而后传播到安哥拉、苏丹、赞比亚等地，因此被称为“非洲猪瘟”。非洲猪瘟有着高传染性，猪群、野猪是主要传播途径，无法传染给狗、猫、羊等动物，人也不会传染。不过，DNA病毒在兔子体内盲传26代，对猪依然有致死性。该病有无季节性、无日龄性特点，全年均可出现，一旦患病将快速传播导致生猪大批量死亡，健康的生猪感染病毒将迅速暴发。

非洲猪瘟检测试剂盒

　　非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒说明书

　　【兽药名称】

　　通用名称：非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒

　　汉语拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

　　英文名称：African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit

　　商品名称：无

　　【主要成分与含量】试剂盒中含有如下组分:

试剂盒组分	含量
阳性对照	250μL/管×1管
阴性对照	250μL/管×1管
PCR反应液	850μL/管×1管
萌混合液	150μL/管×1管
说明书	1份/盒
【作用与用途】本试剂盒可用于血液、脾脏、肝脏、淋巴结、样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。扁桃体、肾脏、肌肉、环境样品等

　　【用法与判定】

　　1 用法

　　1.1待检样品釆集、保存及运输

　　1.1.1样品釆集

　　(1) 活猪样品无菌采集抗凝血或血清5mL

　　(2) 病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品无菌采集死猪的牌、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。2?8°C低温运至实验室用于检测。

　　(3) 病猪污染的周边环境采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。2?8°C低温运至实验室用于检测。

　　1.1.2样品保存采集的样品在2?8°C保存应不超过24小时，-70°C条件下保存，避免反复冻融。

　　1.1.3样品运输泡沫箱加冰袋后密封进行运输。包装和运输应符合《高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样品运输包装规范》和关于危险品运输管理的有关规定。

　　1.2样品处理

　　1.2.1血液样品处理抗凝血样品置于离心管中，8000 r/min离心2分钟取上层血浆，编号待检。非抗凝血样品置于离心管中，待凝固后，8000 r/min离心2分钟取200μL上层血清，编号待检。

　　1.2.2组织样品处理取适量脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体、肌肉等组织，置于研磨器或研磨管中研磨，再加适量生理盐水混匀，制成约10%的组织匀浆，8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。

　　1.2.3环境样品处理

　　1.2.3.1粪便、饲料样品处理方法取适量的粪便、饲料放入盛有PBS缓冲液的研磨管中研磨混匀，制成约10%的匀浆液.8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。

　　1.2.3.2污水样品处理方法直接取200μL污水进行核酸提取。

　　1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法进行DNA核酸提取。

　　1.4荧光PCR反应：

　　1.4.1从试剂盒中取出荧光PCR反应液、酶混合液，室温融化后，2000 r/min离心5秒。设被检样品、阳性对照和阴性对照总和为n,则反应体系配制如下：

　　试剂体系

　　PCR 反应液 17× (n+1) μL

　　酶混合液 3× (n+1) μL

　　1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml离心管中加入上述试剂，充分混匀后瞬时离心。按照20μL/ 管分装量将试剂分装至荧光PCR反应管。

　　1.4.3在上述制备好的荧光PCR反应管中分别加入阴性对照、阳性对照各5μL、处理好的待测核酸各5μL,终体积25μL/管，盖好荧光PCR反应管盖，混匀后瞬时离心，转移到荧光PCR仪器上。

　　144将PCR反应管放置在荧光PCR仪样品槽中，在荧光PCR仪上运行以下程序：

步骤	条件	循环数
UNG处理	50 ℃, 2分钟	1
预变性	95 ℃, 3分钟	1
预扩增	95 ℃： 8 秒 55 ℃： 8 秒	5
PCR扩増	95 ℃： 8 秒 55 ℃： 8 秒	40

　　荧光通道选择FAM,在PCR扩增阶段每个循环的55℃时采集荧光信号。设置扩增体系为25μL, 同时要选择passive reference和quencher为none的模式。(注：若荧光PCR仪(如AB17500)按说明书中的反应程序设置后因持温时间短无法运行，可将预扩增和PCR扩增条件变更为95C： 5秒 55°C： 30 秒)

关键词：非洲猪瘟检测试剂盒厂家

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