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今日看点:多抗与单抗谁更强

2015年08月03日 15:39:16 人气: 965 来源: 上海沪鼎生物科技有限公司

多克隆抗体(多抗)能识别任一抗原上的多个表位,而单克隆抗体(单抗)仅检测任一抗原上的一个表位。但是多抗和单抗两者有着属于各自的优点和缺点。今天要给朋友们说的正是多抗和单抗的差异。

多克隆抗体的优点:
1. 多克隆抗体可有助于放大低表达水平的靶蛋白信号,因为靶蛋白可在多个表位上结合不止一个抗体分子。但是这会给定量实验造成不利影响,因为结果将变得不准确

2. 比单克隆抗体更能容许抗原中的微小变化。

3. 由于能识别多个表位,多克隆抗体可在IP/ChIP中得到更好的结果。

4. 它们会识别出与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白质,或者从非免疫原物种的组织样品中筛选靶蛋白,例如当未测试物种中的抗原性质未知时,有时会使用多克隆抗体。这也使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。
5. 多表位通常可提供更为有力的检测。

6. 多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的。
7. 多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常可识别多个结构域。
不足之处:
1·易于产生批次间差异。
2·产生大量非特异性抗体,有时可能在某些应用中产生背景信号。
3·多表位使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。
客观事实:
1. 识别任一抗原上的多个表位。获得的血清将包含不同亲和力抗体的异质复合体混合物。
2. 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
3. 肽免疫原通常用于产生靶向*表位的多克隆抗体,特别适合高同源性的蛋白家族。
抗体制备:
1. 制备所需技术和技能不高。
2. 制备时间短。
3. 多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域,因为多克隆抗血清通常可识别多个结构域。
 
单克隆抗体优点:
1. 杂交瘤制得后,就成为了恒定的再生源,所有批次都将相同–对确保实验步骤和结果的一致性和标准化非常有帮助。
2. 单克隆抗体通常在切片和细胞染色造成的背景较低。因为它们以更强特异性检测一个靶表位,所以不太可能与其它蛋白质发生交叉反应。
3. 与多克隆抗体相比,单克隆抗体的同质性非常高。如果实验条件保持不变,单克隆抗体的各实验结果重现性很高。

4. 由于具有特异性,单克隆抗体非常适于用作分析测定中的一抗,或者用于检测组织中的抗原,并且通常所产生的背景染色显著低于多克隆抗体。
5. 单克隆抗体的特异性能使其在混合物中和抗原地结合。
不足之处:
1·可产生大量特异性抗体,但是可能特异性过强。
2·经过抗原的化学处理后比多克隆抗体更易于丢失表位。这可通过使用同一抗原的两个或多个单克隆抗体进行补偿。
客观事实:
1. 仅检测抗原上的一个表位。
2. 它们仅由一个抗体亚型组成。在需要二抗进行检测时,应针对正确的亚类选择抗体。
抗体制备:
1. 需要高技术。
2. 需要先培训才能使用技术。
3. 制备杂交瘤耗时长。

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