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如何选择液相色谱仪的梯度洗脱与等度洗脱

2015年04月17日 20:29:20 人气: 5251 来源: 山东滕州鲁创分析仪器有限公司

有些色谱知识的都知道,液相色谱仪的梯度洗脱和气相色谱仪中的程序升温类似,给色谱分离带来很大的方便,已成为液相色谱仪*的部分。

那么问题来了,什么是梯度洗脱?比等度洗脱有什么优点呢?所谓梯度洗脱,就是有两种或两种以上不同极性的溶剂,在分离过程中按照一定程序连续地改变,以改变流动相的配比和极性。通常用的流动相为二元溶剂。在梯度运行期间,强溶剂B(如反相HPLC中的甲醇)的浓度增大。一般以这种溶剂中强溶剂B的体积比(%B)表示。

一、现在有许多实验室在使用液相色谱仪的梯度洗脱技术,这是因为梯度洗脱可克服等度洗脱中的一些弱点问题:

1、减少手工比例配比流动相,从而避免由此引起的误差;

2 避免早流出峰分离度不好的缺点;

3避免晚流出峰峰变快峰高降低的缺点;

4 避免混合物容量因子范围宽时分析时间长的缺点;

5 避免保留时间长的组分污染色谱柱的缺点。

二、梯度洗脱液相色谱仪适合于以下几种分析情况:

1 具有较宽容量因子范围的样品,即组分较为复杂的;

大分子样品,相对分子质量大于1000的,尤其是生物样品。

、一些含有高保留时间的组分会干扰样品分析,如果在一次分析中不能把它洗脱出去,就会残留污染色谱柱,并影响下一次的样品分析。

4 即使在使用等度时也可以使用梯度洗脱选择流动相的比例。

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